Το έτος [[1499]] - [[1500]], ο Βεσπούτσι συμμετείχε σε μια αποστολή που οδηγήθηκε από τον [[Αλόνσο ντε ΟγιέδαΟχέντα]] (Alonso de Ojeda). Όταν έφτασαν στην ακτή της σημερινής [[Γουιάνα]]ς, οι δύο τους φαίνονται να χωρίζουν. Ο Βεσπούτσι έπλευσε νότια, ανακάλυψε τις εκβολές του [[Αμαζόνιος|Αμαζονίου]] ποταμού, πριν να γυρίσει πίσω και βρεθεί στο [[Τρινιντάντ και Τομπάγκο|Τρινιντάντ]] και τον ποταμό [[Ορινόκο]] και επιστρέψει στην Ισπανία μέσω της [[Ισπανιόλα]]ς. Ο Βεσπούτσι ισχυρίστηκε, σε μια επιστολή του προς τον [[Λορέντσο των Μεδίκων]], ότι καθόρισε το γεωγραφικό μήκος που βρισκόταν αστρικά στις [[23 Αυγούστου]] του [[1499]], ενώ ήταν σε αυτό το ταξίδι. Αλλά ο ισχυρισμός του είναι σαφώς ψευδής, γεγονός που δημιουργεί μεγαλύτερη αμφιβολία για την αξιοπιστία του Βεσπούτσι.
